Engelhardia Roxburghiana -lehtiuute DHQvalmistaja
Engelhardia Roxburghiana -lehtiuute Dihydrokersetiinion dihydroflavonoliyhdiste, jota löytyy monista kasveista. Markkinoilla olevan synteettisen dihydrokversetiinin lisäksi tärkein luonnollinen lähde on lehtikuusi. Yrityksemme on havainnut Astragalus membranaceuksen lehtiä koskevilla tutkimuksilla, että Astragalus membranaceusin luonnolliset lehdet sisältävät myös dihydrokvertiinia. Kun lehtikuusivarat ovat yhä niukat, yrityksemme löytö voi merkittävästi alentaa dihydrokersetiinin tuotantokustannuksia ja tarjota markkinoiden kustannustehokkaimmat dihydrokversetiinituotteet.
Kiinan suurimpana dihydrokversetiinin tuottajana KINTAIlla on kaksi pääprosessireittiä dihydrokversetiinin valmistamiseksi: biosynteesi ja uutto. Tällä hetkellä valmistamamme dihydrokersetiini uutetaan pääasiassa lehtikuusesta, ja osa on uutettu susimarjan lehdistä. Biosynteesi on siirtymässä pilottituotantotestiin, ja valmistuttuaan se tuo sinulle laadukkaita ja edullisia dihydrokversetiinituotteita. Seuraavassa esittelemme pääasiassa yrityksemme tämänhetkistä uuttoprosessia susimarjan lehtiä käyttäen ja biosynteesin synteesimenetelmää. Jos olet kiinnostunut tiedoista, ota meihin yhteyttä saadaksesi ammattimaisempia vastauksia.
KINTAI Dihydrokvertiinin uuttaminen keltaisista susimarjan lehdistä
Tuotannossamme käytetään monivaiheista prosessia varmistaakseen tuotteen puhtauden ja korkean laadunEngelhardia Roxburghiana -lehtiuute DHQ.
Raaka-aineen käsittely: Valitse tuoreet keltaiset susimarjan lehdet, poista epäpuhtaudet ja leikkaa ne varmistaaksesi, että aktiiviset aineet vapautuvat täysin myöhemmässä uuttoprosessissa.
Uutto ja väkevöinti:Käytä 80 % etanoliliuosta kahteen palautusjäähdytysuuttoon. Lisää 6-kertainen määrä etanolia ensimmäisellä kerralla ja 5-kertainen määrä toisella kerralla varmistaaksesi aktiivisten aineiden tehokkaan uuttamisen keltaisista susimarjan lehdistä. Uute konsentroidaan alennetussa paineessa etanolin poistamiseksi tuotteen turvallisuuden varmistamiseksi.
Pylväskromatografinen puhdistus:Käytä makrohuokoisia adsorptiohartseja, kuten D101, AB-8 ja NKA-II lisäerotukseen ja puhdistamiseen. Eluointiprosessi on hieno ja eluointiin käytetään 70 % etanoliliuosta. Uute on väriltään läpinäkyvää.
Kiteytys:Tarkalla liuotinkonsentraatiolla ja jäähdytysprosessilla syntyy vaaleankeltaisia dihydrokersetiinineulakiteitä.
Hydrolyysi:Uute hydrolysoidaan ja kiteytetään uudelleen, jolloin saadaan erittäin puhdasta dihydrokversetiiniä, jonka pitoisuus on 95,7 % -96,5 %.
HPLC-kromatogrammianalyysi
Tuotantoprosessin aikana kaikki dihydrokversetiini testataan korkean suorituskyvyn nestekromatografialla tuotteen korkean puhtauden ja tehokkuuden varmistamiseksi. Kuten kuvasta näkyy, HPLC-kromatogrammin tarkka analyysi osoittaa dihydrokversetiinipitoisuuden.
COA& DHQ:n nestekromatografiaanalyysiraportti
Kintain viimeisin tutkimus dihydrokversetiinin synteesistä
Tutkimusryhmämme on äskettäin tehnyt tärkeän läpimurron dihydrokvertiinin mikrobisynteesin tutkimuksessa
Dihydrokersetiini on tärkeä flavonoidiyhdiste, jota käytetään laajalti elintarvikkeissa, lääketieteessä ja maataloudessa sen antioksidanttisen, anti-inflammatorisen, kasvaimia ehkäisevän ja muun fysiologisen vaikutuksensa vuoksi. Perinteisiä kasvinpoistomenetelmiä rajoittavat kuitenkin vuodenajat, maantieteelliset olosuhteet ja raaka-ainetarjonta, mikä johtaa korkeisiin tuotantokustannuksiin ja epävakaaseen tuotantoon. Siksi mikro-organismien käytöstä dihydrokversetiinin heterologiseen synteesiin tulee houkutteleva vaihtoehto.
Mikrobisynteesillä ei voida ainoastaan välttää näitä kasvien uuttamisen pullonkauloja, vaan sillä on myös lyhyt tuotantosykli, alhaiset ympäristövaatimukset ja helppo laadunvalvonta. Kuitenkin tekijöiden, kuten aineenvaihdunnan säätelyn, rajoituksista johtuen, kuinka tehokkaasti saavuttaa dihydrokversetiinin synteesi mikro-organismeissa, on edelleen suuri haaste. Keskeisten entsyymien seulonnan, promoottorisuunnittelun, monikopiointegraation ja aineenvaihdunnan uudelleenohjelmoinnin avulla olemme parantaneet merkittävästi dihydrokversetiinin tuotantoa ja tarjonneet tehokkaan tavan sen teolliseen tuotantoon.
Avainentsyymien F3'H ja F3H seulonta ja optimointi
Dihydrokversetiinin synteesiprosessi perustuu kahden avainentsyymin, F3'H:n ja F3H:n, katalyysiin. F3'H katalysoi (2S)-naringeniinin hydroksylaatiota flavonoidirungon C-3'-asemassa (2S)-eriodiktyolin muodostamiseksi; F3H muuttaa (2S)-naringeniinin dihydrokaempferoliksi. Dihydrokersetiinin tuotannon parantamiseksi seuloimme kolme F3'H:ta ja viisi F3H:ta eri kasveista. Kokeiden jälkeen havaittiin, että SmF3'H:lla ja CsF3H:lla oli parhaat katalyyttiset vaikutukset, ja ne tuottivat (2S)-eriodiktyolia ja dihydrokaempferolia saannoilla 254,1 mg/l ja 173,4 mg/l vastaavasti. Siksi valitsimme nämä kaksi entsyymiä myöhempää synteesin optimointia varten.
Promoottoriprojektien optimointi
Parantaaksemme edelleen SmF3'H:n ja CsF3H:n ilmentymistä otimme käyttöön promoottoritekniikan ja optimoimme näiden avainentsyymien ilmentymistasot. Seulomalla eri vahvuisia promoottoreita havaittiin, että kun SmF3'H ja SmCPR ekspressoitiin PGAL1- ja PGAL10-promoottoreiden ohjauksessa, (2S)-eriodiktyolin tiitteri oli korkein saavuttaen 382,1 mg/l. Samalla tavalla lisäsimme merkittävästi dihydrokaempferolin tuotantoa säätelemällä CsF3H:n ilmentymistä ja käyttämällä erivahvuisia promoottoreita, kuten PTDH1, PGAL7 ja PSSA1. Tämä optimointi osoittaa, että nostamalla avainentsyymien ilmentymistasoa voidaan kohdemetaboliittien synteesitehokkuutta parantaa tehokkaasti.
Monen kopion integrointi parantaa tulosta
Parantaaksemme dihydrokversetiinin tuotantoa otimme käyttöön geenien monikopiointegraatioteknologian. Integroimalla dihydrokversetiinin synteesireitin geenikopio Saccharomyces cerevisiaen Ty2-monikopiokohtaan saimme onnistuneesti korkeatuottoisen FQ26ty-kannan, jonka dihydrokversetiinitiitteri saavutti arvon 71,4 mg/l. Kvantitatiivinen geenianalyysi osoitti, että SmF3H-, SmF3'H- ja SmCPR-geenien kopiomäärät vaihtelivat välillä 2,87 - 3,44, mikä osoittaa, että geenin monikopiointegraatio lisäsi merkittävästi dihydrokversetiinin tuotantoa. Lisäksi integroimalla lisää kopioita synteesireitin geeneistä, rakensimme kannan FQE-D-sarjan ja onnistuneesti lisäsimme dihydrokversetiinin tuotannon 74,5 mg/l:aan. Tämä tulos osoittaa, että avainsynteettisten reittien geenien kopiomäärän lisääminen on tehokas strategia kohdetuotteiden saannon lisäämiseksi.
Metabolinen uudelleenohjelmointi ja hiiliaineenvaihdunnan optimointi
Keskeisten entsyymien ja geeniintegraation optimoinnin lisäksi ohjelmoimme metabolisesti uudelleen Saccharomyces cerevisiaen hiiliaineenvaihduntajärjestelmää lisätäksemme edelleen dihydrokversetiinin tuotantoa. Ensin otimme käyttöön PAL-reittiin liittyviä geenejä, mukaan lukien AtPAL2, AtC4H, AtATR2 ja ScCYB5, ja tuloksena oleva kanta FQ27 saavutti dihydrokversetiinin tuotannon 87,8 mg/l. Myöhemmin lisäsimme saantoa edelleen arvoon 103,9 mg/l yli-ilmentämällä shikimate-reitin avaingeenejä ARO1/2/3 ja E. colista peräisin olevaa EcAROL-geeniä. Lisäksi otimme käyttöön myös heterologisen fosfoketolaasireitin yhdistääksemme tiukasti keskushiilen aineenvaihdunnan erytroosi-4-fosfaatin synteesiin, ja sitten saimme kannan FQ29, jonka dihydrokversetiinituotanto oli 107,5 mg/l.
NADPH:n ja alfa-ketoglutaraatin tarjonnan optimointi
F3'H:n on kulutettava NADPH:ta katalyyttisen prosessin aikana, kun taas F3H tarvitsee -ketoglutaraattia apusubstraattina. Siksi lisätäksemme näiden kahden avainaineen tarjontaa yli-ilmentimme geenejä, kuten TYR1 ja ZWF1, lisätäksemme NADPH:n tarjontaa. Kokeet osoittavat, että TYR1:n ja mutantin BDH1*:n yhteisilmentyminen lisää dihydrokersetiinin tuotantoa 20,2 % saavuttaen arvon 175,8 mg/l. Lisäksi ARO8:n yli-ilmentyminen edisti edelleen -ketoglutaraatin tuotantoa, mikä johti dihydrokersetiinin tuotantoon, joka saavutti 206 mg/l. Lopuksi, yli-ilmentämällä IDH1:tä, saimme korkeatuottoisen kannan FQ38, jonka saanto oli 235,1 mg/l.
Teollistetun tuotannon tutkiminen
Laboratoriomittakaavaisen optimoinnin perusteella suoritimme edelleen syöttöeräkäymiskokeita 5 litran bioreaktorissa. Lisäämällä 5 g/l CaCO3:a käymisprosessin aikana onnistuimme nostamaan dihydrokversetiinitiitterin 873,1 mg/l:aan 114 tunnissa, mikä teki uuden tuotantoennätyksen.
Yhteenvetona voidaan todeta, että olemme merkittävästi parantaneet dihydrokversetiinin mikrobisynteesin tehokkuutta systemaattisen aineenvaihduntatekniikan ja fermentaatioprosessin optimoinnin avulla. Tämä tutkimus ei ainoastaan tarjoa teknistä perustaa dihydrokversetiinin teolliselle tuotannolle, vaan tarjoaa myös referenssin muiden kasvien sekundaaristen metaboliittien mikrobisynteesille.
Monipuoliset sovellukset
Ravintolisät
Funktionaaliset ruoat
Kosmetiikka
Yhteistyökumppaniksi menestyäksesi
Aikakaudella, jolloin terveys ja hyvinvointi ovat painopisteen kohteena, DHQ on johtava pitkäikäisyyden, elinvoimaisuuden ja yleisen hyvinvoinnin tavoittelu. Kiinan suurimpana lehtikuusiuutteiden toimittajana DHQ Kintai on ensisijainen kumppanisi korkealaatuisten, luonnollisten ratkaisujen tueksi terveyteen ja hyvinvointiin liittyvissä tavoitteissasi.Jos haluat ostaa korkealaatuisiaEngelhardia Roxburghiana -lehtiuute, ota rohkeasti yhteyttä osoitteeseensales@kintaibio.comtai palautetta seuraavalla sivulla.
Suositut Tagit: engelhardia roxburghiana -lehtiuute, Kiina engelhardia roxburghiana -lehtiuutteen valmistajat, toimittajat, tehdas
